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固相萃取有哪些注意事項
更新時間:2024-03-28 點擊次數:583

固相萃取有哪些注意事項

注意事項

1、盡量慢

我們(men) 在用固相萃取時,麵臨(lin) 的一個(ge) 問題就是:液體(ti) 應該以什麽(me) 速率過柱流出,我的經驗是,要想效果好,就要慢,盡量慢。

對於(yu) 固相萃取柱中的填料,我們(men) 如果局部放大地看,能夠看到其實它們(men) 是有很多的空隙,液體(ti) 流通的渠道很多,如果流得快,相當比例的待測組分還來不及與(yu) 填料充分作用就地從(cong) 通道流失;所以要慢,給它們(men) 一個(ge) 充分作用的機會(hui) 。

如何慢呢?一個(ge) 竅門就是不要用配合抽氣機使用的所謂固相萃取器,而采用再普通不過的重力法。利用重力的作用使液體(ti) 向下流出。在實驗速度上,重力法遠不如吸力法,但是在實驗效果方麵,重力法遠比吸力法優(you) 勝,用吸力法隻能得到譜帶吸附,用重力法卻能得到柱頭吸附,在速度和效果兩(liang) 者的平衡中,我們(men) 還是傾(qing) 向於(yu) 優(you) 先保證好的效果。

2、盡量少

在固相萃取條件選擇上,有人為(wei) 了提高提取效率,盡量多加液體(ti) ,或選擇填料量大的小柱,我覺得大可不必如此。尤其在用重力法時,由於(yu) 效率高,很多情況下是柱頭吸附,並不是所有的填料都在起作用,填料多了不僅(jin) 液體(ti) 流出速度會(hui) 更慢,而且在洗脫時的擴散會(hui) 很明顯。

因此建議,夠用就行,在能保證效率時,填料盡量少,加液也不宜多。

3、實驗條件不宜過分細化

固相萃取從(cong) 原理上是色譜分離,但是在操作時最好隻把它作為(wei) 吸附萃取劑使用,由於(yu) 填料性質、鬆緊常有差異,因此在實際實驗中不必因為(wei) 追求效果的最佳化而設計出很複雜的洗脫程序。

在建立條件中,我們(men) 應該盡量多利用現成的資料,盡快地建立起體(ti) 係,同時要對操作過於(yu) 複雜的步驟保持警惕性,在實驗效果,實驗速率和易操作性三者中取得平衡點。

4、隻用一次

固相萃取柱最好隻用一次。因為(wei) 從(cong) 嚴(yan) 格的意義(yi) 上來說,很多物質的吸附是不可逆的,一次吸附,無法洗脫,影響著下一次吸附,雖然有人做過重複利用的實驗,但是總體(ti) 來說為(wei) 了節省一點經費而大大增加了結果的不可靠性和不確定性,是很不合算的行為(wei) 。

因此建議,隻用一次。如果想節省經費可以從(cong) 減少填料量和使用小容積管入手,盡量用堆疊接頭和延長管。

5、慎用固相萃取器

所有的供應商都會(hui) 在推薦固相萃取柱的同時,固相萃取器,固相萃取器也要幾千,如果貼個(ge) 進口商標價(jia) 格更要加幾倍,這樣的價(jia) 格還不包括抽氣機。但是這樣的配置就是再加上調速開關(guan) ,也很難得到好的結果,主要問題就是把小柱的不平行性放大了。

建議:實在不適合重力法的才用固相萃取器。

至於(yu) 全自動固相萃取器,應該說,現在市麵上還沒有比較理想、適合食品檢測的機器,主要問題就是無法解決(jue) 一批小柱中液麵下降不一致的問題,加上價(jia) 格很昂貴,性價(jia) 比也自然不高。帶液麵測量的也不能對多批量的小柱同時檢測,且有交叉汙染的危險。

目前的全自動固相萃取器基本上是走重力法路線,倒是回避了密封的難題。

6、不可忽視傳(chuan) 統的液體(ti) 萃取

有些人在初次接觸固相萃取時,總覺得它能取代液體(ti) 萃取,實際上就象毛細管電泳無法取代液相色譜一樣。固相萃取在某些場合比液體(ti) 萃取合適,但是在更多情況下,還是傳(chuan) 統的液體(ti) 萃取更可靠更合適。這一點從(cong) 目前實驗技術的實際發展可以得到印證。

關(guan) 於(yu) 液固萃取,我們(men) 不要僅(jin) 僅(jin) 把它看作是一個(ge) 提取過程,從(cong) 另一個(ge) 角度來看,它還是一個(ge) 淨化過程,是把固形幹擾物排除淨化的過程。理解這一點,有助於(yu) 我們(men) 優(you) 化選擇實驗方法。

7、實用性是實驗設計成功與(yu) 否的最終準繩

在設計一個(ge) 實驗時,開始要考慮到其技術上是否先進。而在實際運用中,最終決(jue) 定這個(ge) 方法是否可行,是否能夠存在的關(guan) 鍵是實用性。一個(ge) 實驗方法不僅(jin) 要解決(jue) 問題,而且能夠在人力,物力,財力三方麵達到平衡,且滿足可持續、可重複操作的要求。

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